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在使用親水性相互作用色譜(HILIC)時,保留時間不穩定或“亂跳”可能由多種因素引起。以下是一些可能的原因及建議的解決方案:
可能原因及解決方案 流動相組成不穩定:
原因:流動相中的水與有機溶劑比率不一致,或有機溶劑的濃度不穩定。 解決方案:確保流動相的配制嚴格按照比例,使用高純度的試劑,并在使用前進行充分混合。 柱溫波動:
原因:柱溫不穩定可能導致保留時間的變化。 解決方案:使用溫控系統保持柱溫恒定,避免環境溫度變化對實驗的干擾。 進樣量不一致:
原因:進樣量不一致會導致保留時間的變化。 解決方案:使用自動進樣器,確保每次進樣的體積一致,或手動進樣時注意控制。 樣品溶劑不匹配:
原因:樣品溶劑與流動相不匹配可能導致保留時間變化。 解決方案:確保樣品溶劑與流動相的相容性,盡量使用與流動相相似的溶劑。 柱飽和或老化:
原因:色譜柱的使用壽命或狀態不佳,可能導致分離效果不穩定。 解決方案:定期更換色譜柱,或按照廠商的建議進行清洗和再生。 系統氣泡或滲漏:
原因:泵或管路中的氣泡或滲漏問題會影響流動相的均勻性,從而影響分離效果。 解決方案:檢查泵和管路,確保無氣泡或滲漏,必要時進行排氣或更換部件。 檢測器靈敏度問題:
原因:檢測器的靈敏度或響應不穩定。 解決方案:定期進行檢測器的校準和維護,確保其正常工作。 樣品穩定性:
原因:樣品在分析過程中可能發生降解或變化。 解決方案:確保樣品在分析前的保存條件得當,并盡量縮短從準備到分析的時間。 |
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